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 慢病毒包装

1 特点:
1.1 直接包装成为假病毒颗粒,对分裂和非分裂细胞均有感染作用,适合RNAi研究和体内实验中难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。
1.2 可以通过简单方式,在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。
1.3 可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。
1.4 无需任何转染试剂,操作简便。
1.5 可以根据客户需要制备多种标记。
 
2 原理:
    慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。
 
3 慢病毒包装简要流程:
3.1 含有目的基因的慢病毒表达载体的构建和质粒纯化提取。
注:客户也可以提供构建好的重组慢病毒表达载体。
3.2 慢病毒表达载体与包装系统共转染病毒包装细胞。
3.3 收集病毒液。
3.4 纯化和浓缩病毒。
3.5 分装、- 80 oC保存。
3.6 滴度测定及无菌检测。
 
4 本公司提供的最终产品包括:
4.1 重组后的慢病毒载体质粒以及测序图谱(客户提供质粒的除外)。
4.2 病毒无菌检测结果。
4.3 慢病毒储液及相应的病毒滴度。
 
5 我们保证:
5.1 制备的病毒颗粒携带片段的正确性(客户提供质粒的除外)。
5.2 病毒颗粒的总数和病毒滴度:如无特殊要求我们提供1mL滴度为1×107 - 1×108 vp/ mL的病毒储液。

 

 

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