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 甲基化特异性PCR(MSP)检测服务

MSP原理:双链DNA变性解链后,在亚硫酸氢钠作用下发生C→U(T)转化,C若已有甲基化则不会改变;DNA甲基化修饰只发生于CpG岛上,因此在亚硫酸氢钠作用下,CpG岛若无甲基化修饰,则序列中的C完全转化为U,CG→UG,若有甲基化则C不会变为U,针对CpG岛甲基化和非甲基化两种DNA设计甲基化引物MF/MR和非甲基化引物UF/UR进行PCR,如果DNA CpG岛未发生甲基化(正常组织),那么非甲基化引物UF/UR会扩增出相应条带;如果DNA CpG岛发生甲基化(癌变组织),那么甲基化引物MF/MR会扩增出相应条带。示意图如下:
 



方法:分别从正常组织和石蜡切片中提取基因组DNA,用亚硫酸氢钠处理基因组DNA,试剂盒纯化DNA做为模板,分别用甲基化引物MF/MR和非甲基化引物UF/UR进行PCR,从而确定基因有无CpG岛甲基化。

MSP特点:适于研究中大量样本的DNA片段,具有方便快捷,灵敏度高的优点。

注意事项:客户需要提供样品的石蜡包埋物及所检测项目的参考文献。

 

 

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