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 CRISPR基本介绍

  CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)RNA,是最近几年才发现的原核生物中的调控RNA,用以抵御病毒和质粒入侵。在II型CRISPR系统中,CRISPR RNA(crRNA)与转录激活crRNA(Trans-activating crRNA, tracrRNA)退火形成的复合物能特异识别基因组序列,引导Cas9核酸内切酶在目的片段生成DNA双链断裂(double-strand breaks, DSBs)。CRISPR-Cas系统的高效基因组编辑功能已被应用于多种生物,包括人、小鼠、大鼠、斑马鱼、秀丽隐杆线虫、植物及细菌。多个科研小组的研究都显示,与锌指核酸酶(ZFNs)和转录激活样效应核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases, TALEN)相比较,CRISPR-Cas系统介导的基因组靶向实验在真核细胞中具有相似甚至更高的效率。



  Biomics公司专注于RNA基因调控多年,最新推出基因组编辑工具CRISPR/Cas9专家系统,该系统灵活简单、可以对特定基因组位点进行切割置换,特异性高、细胞毒性低。CRISPR/Cas9系统可广泛应用于基因组工程,如基因抑制,基因敲除,基因敲入,基因修复等。CRISPR-Cas9体系的RNA-DNA识别机制为基因组工程研究提供了一项简便而强大的工具。其最重要的优势是Cas9蛋白可在多个不同的gRNA的引导下同时靶向多个基因组位点,起到多靶点调控的作用。




 CRISPR与RNAi的区别:

  目前已经广泛应用的RNAi技术的靶标是mRNA,而CRISPR通过RNA识别DNA序列然后再改变DNA序列,是可以遗传的。由于编码mRNA的DNA序列只占总DNA的极少部分,因此靶向DNA序列的CRISPR的靶标要比RNAi广得多,更有可能筛选出针对某DNA序列的特异CRISPR靶标。


 作为一种新的基因编辑技术,CRISPR/Cas9有以下特点和优势:

  1、操作简单,靶向精确性更高。
  sgRNA靶向序列和基因组序列必须完全匹配,Cas9才会对DNA进行剪切。编码sgRNA的序列不超过100bp,因此比构建TALENs和ZENs更简单方便,用于CRISPR的sgRNA识别序列仅需20个核苷酸。

  2、CRISPR/Cas9系统是由RNA调控的对DNA的修饰,其基因修饰可遗传。

  3、基因修饰率高,基因调控方式多样,例如敲除、插入、抑制、激活等。

  4、可实现对靶基因多个位点同时敲除。

  5、无物种限制。

  6、实验周期短,最快仅需2个月,节省大量时间和成本。


 已合作单位:

  北京大学(人)、复旦大学(人)、同济大学(人)、上海交通大学(人)、首都医科大学(鸭)、中烟郑州烟草研究所(烟草)、福建农林大学(草菇、金针菇、大肠杆菌)、温州医学院(鼠)、浙江工业大学(枯草芽孢杆菌)、宁夏大学(解淀粉芽孢杆菌)、深圳大学(人)、暨南大学(鼠/人)、中国水产科学研究院(青鳉)、山东大学(人)、东北大学(动物)、内蒙古自治区医院(人)、弗吉尼亚理工学院(人)、南京农业大学(家蚕/二化螟)、扬州大学(淋病球菌)、中国农业大学(猪)、江苏省农业科学院(支原体)、南方医科大学(人)、武汉大学(水稻/人) 上海市儿童医学中心(人/斑马鱼 激活) 西北农林科技大学(山黧豆)、中国医学科学院医学生物学研究所(人)。吉林农业大学(大肠杆菌/维氏菌) 吉林省农业科学院(双子叶植物) 南开大学(大肠杆菌)、中国农业科学院兰州兽医研究所(金仓鼠)、甘肃农业大学(丝状真菌)、西南大学(人)、 中山大学(单子叶植物)、天津医科大学(人)、湖南师范大学(人)、福建省农科院(卵菌)、广西大学动物繁殖研究所(动物、激活)、中科院国家蛋白质科学中心(人、lncRNA)、华南理工大学、东北师范大学(动物)、新乡医学院(动物)、中国科学院生态环境研究中心(成团泛菌)……


 物种包括:

  1.人;2.家鼠;3.烟草;4.家兔;5.家蚕;6.金仓鼠;7.青鳉鱼;8.芽孢杆菌;9.大肠杆菌;10.食用菌;11.丝状真菌;12.鸭;13.猪;14. 山黧豆;15.卵菌;16.成团泛菌;17.水稻;18.支原体;19.乙肝/HPV等双链DNA病毒;……



 客户发表的文章:

  利用CRISPR/Cas 9技术构建大肠杆菌aroA基因的敲除系统及其初步应用.pdf
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